1、含义上的区别。光盘是以光信息做为存储的载体并用来存储数据的一种物品。U盘是一种使用USB接口的无需物理驱动器的微型高容量移动存储产品，通过USB接口与电脑连接，实现即插即用。
2、原理上的区别。光盘是利用激光原理进行读、写的设备，是迅速发展的一种辅助存储器，可以存放各种文字、声音、图形、图像和动画等多媒体数字信息。U盘是计算机把二进制数字信号转为复合二进制数字信号，读写到USB芯片适配接口，通过芯片处理信号分配给EEPROM存储芯片的相应地址存储二进制数据，实现数据的存储。
3、组成上的区别。光盘由基板、记录层、反射层、保护层、印刷层组成。基板是沟槽等的载体和光盘物理外壳；记录层是烧录时刻录信号的地方，在基板上涂抹专用有机染料，供激光记录信息；反射层是光盘第三层，反射光驱激光光束的区域；保护层保护光盘反射层及染料层防止信号被破坏；印刷层是光盘背面。U盘主要由外壳+机芯组成，机芯包括一块PCB加USB主控芯片加晶振加贴片电阻、电容加USB接口加贴片LED（不是所有的U盘都有）加FLASH（闪存）芯片；外壳按材料分类，有ABS塑料、竹木、金属、皮套、PVC软件等；按风格分类有卡片、笔型、迷你、卡通、商务、仿真等。