责编
兮
当今,关于一些恶性肿瘤如黑色素瘤,即使经由采纳阻断内源性的免疫抵御因子CTLA-4和PD-1/PD-L1的抗体类药物来从头激活免疫反响的免疫疗法能显然拉长患者的生活期,但是采纳该疗法同时会因加强免疫系统的活性而激发炎性反响等副效用,即免疫探测点阻断引发的免疫关联不良事变(immune-relatedadverseevents,irAEs)。据报导,在接纳抗CTLA-4和PD-1药物诊疗的病人中,大略有60%的病人会引发严峻的*性反响。只管关联病人的统统器官均或者遭到irAEs的影响,但irAEs最常引发肠道炎症反响(checkpointinhibitor-inducedcolitis,+CPIcolitis)。在接纳免疫诊疗的病人中,大略有10%-20%的病人最后会进展成严峻的colitis并或者危及性命。但是,关联irAEs的诱因于今照旧不知道,而且在经由免疫疗法管教的小鼠体内没有发觉响应的irAEs,是以很难袭用适宜的动物模子去剖析激发+CPIcolitis和其余irAEs的分子机制。
年6月29日,哈佛医学院和Dana-Farber癌症协商所的KaiW.Wucherpfennig、Guo-ChengYuan病院MichaelDougan协做(配合一做为AdrienneM.Luoma和ShengbaoSuo博士)在Cell上颁发文章MolecularPathwaysofColonInflammationInducedbyCancerImmunotherapy,经由袭用单细胞RNA测序(scRNA-seq)和流式细胞手艺(flowcytometry)直接剖析了近期采纳免疫疗法的癌症病人的肠道活体模范,深入剖析了引发+CPIcolitis的细胞和分子通路并推断了潜在的诊疗靶点。
为了从不同层面比较剖析引发+CPIcolitis的起源,统统模范被分红三组:一般比较人群(Control),得了黑色素瘤并经由免疫诊疗后没有激发肠道炎性反响的病人(+CPInocolitis),以及有引发肠道炎性反响的病人(+CPIcolitis)。首先经由对统统模范中CD45+免疫细胞的剖析,发觉Control组和+CPInocolitis组具备特别彷佛的转录组图谱,而在+CPIcolitis组却能窥察到特别显著的T细胞和骨髓细胞(myeloidcell)富集情状,是以该效果声明肠道内某些免疫细胞构成的变动与+CPIcolitis的形成具备很强的关联性。
随后,为了进一步剖析T细胞在不同组之间的不同性,依照T细胞分裂轨迹,统统CD3+T细胞被细分为CD8+T细胞和CD4+T细胞。经由对CD8+T细胞的聚类以及不同细胞典型构成份析发觉,高表白GZMB和IFNG基因的*性T细胞(cytotoxicTcells)和增殖T细胞(cyclingTcells)险些全部富集在统统+CPIcolitis模范中。与之相悖的是结构常驻影象T细胞(tissue-residentmemoryTcells,Trm)的含量却在+CPIcolitis模范中体现出显然的下落趋向。其它,经由流式细胞术尝试考证了以上窥察到的景象,这潜在表懂得+CPIcoliti病人中的Trm和*性T细胞/增殖T细胞之间存在某种迁徙转折相干。
调理T细胞(regulatoryTcells,Treg)是一群具备负调控免疫反响的淋巴细胞,其首要存在于CD4+T细胞中。关联小鼠模子协商声明,抗CTLA-4免疫诊疗也许致使小鼠肿瘤内部Treg细胞的消逝,是以irAEs的形成被觉得与体内Treg细胞的消逝有肯定程度的关联。但是有道理的是,在对CD4+T细胞的剖析发觉,FoxP3+Treg细胞比例和FoxP卵白表白量在+CPIcolitis模范中均有显著晋升。Treg单细胞转录组剖析也进一步鉴识出了+CPIcolitis奇异性的具备Thelp1细胞活性的Treg亚细胞群。该效果声明在肿瘤免疫疗法激发的肠炎反响并不是由Treg细胞比例的消沉致使的,炎性微处境影响了Treg细胞自己的表白图谱。
T细胞受体(Tcellreceptor,TCR)记号通路的激活能引发T细胞的洪量增殖,每个T细胞都有自己的TCR序列,是以也许经由TCR的序列讯息来剖析+CPIcolitis关联的T细胞典型形成的起源以及细胞之间的分裂轨迹。基于TCR的数据剖析声明,在+CPIcolitis模范的CD8+T细胞中,94.2%的增殖T细胞与*性T细胞具备雷同的TCR序列讯息,这表明在这两种细胞典型之间存在显然的动态变化相干。其它乐趣的是,在+CPIcolitis模范中,有洪量的Trm细胞与增殖T细胞和*性T细胞共用雷同的TCR序列,而在其余两组比较模范中并没有发觉关联的景象。该效果声明在+CPIcolitis模范中,部份增殖T细胞与*性T细胞的形成是由Trm细胞的直接分裂致使,从而注解了在免疫诊疗初期就可以在病人肠道中窥察到炎性病症的起源。
其它,经由对统统CD45+免疫细胞的剖析发觉,骨髓细胞也许显著性富集IFNγ和TNFα记号通路因子。在+CPIcolitis模范中,骨髓细胞显著性高表白趋化因子CXCL9和CXCL10,而这两个基因的表白也许经由配体-受体联合的方法招募CXCR3+效应T细胞(effectorTcells)。经由对骨髓细胞的进一步剖析发觉,在+CPIcolitis模范中能鉴识一组奇异性的巨噬细胞,这组巨噬细胞能高表白可开辟IFN记号通路的CXCL9和CXCL10基因。是以该效果显示,在+CPIcolitis模范中,IFN记号通路也许改动巨噬细胞的转录组图谱并从而经由表白关联趋化因子来招募更多的T细胞来到炎性部位。
接着,经由比较剖析发觉趋化因子受体基因CXCR6一样也许在+CPIcolitis的T细胞中高表白,而受IFN和TNF记号通路调控的CXCR6配体基因CXCL16在骨髓细胞和肥硕细胞(mastcells)中也体现出显著性高表白特点。乐趣的是,CXCR6在多种人类癌症细胞中都呈现高表白,该基因的表白也许反响癌症细胞转变情状,是以以CXCR6做为潜在的诊疗靶点实行抵御或者会消沉癌细胞的转变并灵验改进肠道炎症情状。
综上所述,该劳动初次从单细胞程度详细切磋了肠道模范中不同免疫细胞因免疫诊疗引发变动的机制,发觉了*性CD8+T细胞,增殖CD8+T细胞以及CD4+Treg细胞在+CPIcolitis模范中的富集,而且基于TCR序列讯息考证了+CPIcolitis奇异性以及CD8+T细胞大部份起源于CD8+Trm细胞,着末经由对不同细胞因子的剖析鉴识出了潜在的因免疫探测点阻断引发的肠炎或其余irAEs的诊疗靶点(图1)。
图1:剖析癌症免疫疗法引发的肠炎反响的分子机制
原文链接: